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TaKaRa MiniBEST Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit
品牌 Code No. 包装量 价格 说明书 数量
Takara 9781S 10 次 150 元
Takara 9781 50 次 650 元
 
■ 制品内容 (50 次量)
本试剂盒分Part I 与 Part II两部分。
□ Part I -20℃保存
Proteinase K (20 mg/ml) 1 ml
RNase A (10 mg/ml) 500 μl
 
□ Part II 室温 (15-25℃) 保存  
10×Buffer RCL A*1 2 ml × 2
10×Buffer RCL B*2 16 ml
Buffer GB*3 12 ml
Buffer WA*3 28 ml
Buffer WB*4 24 ml
Elution Buffer 14 ml
Spin Columns 50 支
Collection tubes 50 支
*1和*2使用前按照1:4的比例混合,得到10×Buffer RCL (红细胞裂解液) 。该10×Buffer RCL可以现用现配或在首次使用时将*1全部倒在*2的试剂瓶中,于4℃可保存1年。
*3含有强变性剂,应避免与皮肤、衣物等接触。若不小心接触到眼睛或皮肤时,请立即到医院进行处理。
*4在首次使用前,请添加56 ml的100%乙醇,混合均匀。
 
■ 制品说明
本试剂盒用于从1 μl~1 ml加入各种抗凝剂的无核红细胞 (如哺乳动物) 全血中提取基因组DNA,或从加入各种抗凝剂总体积不超过10 μl的有核红细胞 (如鸟类、鱼类) 全血中提取基因组DNA。试剂盒采用了特别的红细胞裂解方法裂解全血中的大量无核红细胞,再由细胞裂解液裂解白细胞并释放基因组DNA,再结合DNA制备膜技术纯化基因组DNA。本试剂盒具有高效、快速、方便之特点,整个提取操作过程仅需1个小时便可获得高纯度的基因组DNA。提取得到的基因组DNA可用于PCR反应、Southern杂交以及RAPD、AFLP、RFLP等多种分子生物学实验。
 
■ 保存与运输
1. 本试剂盒分两部分保存和运输,Part I请在-20℃保存和运输;Part II在室温下 (15-25℃) 保存和运输。
2. 10×Buffer RCL A,10×Buffer RCL B可于室温下保存,按比例混合后的10×Buffer RCL可于4℃保存1年,客户可根据实际使用情况决定保存方式。
 
■ 实验操作流程图
 
■ 注意事项
1. 应尽量使用新鲜全血,避免反复冻融,以确保提取的基因组DNA的收量及完整性。
2. 血液样品的保存:
① 短期保存:已加入抗凝剂的血液样品可在2~8℃保存最多10天,对于某些实验,例如Southern杂交等,需要得到完整全长的基因组DNA,将血液样品在2~8℃保存请不要超过3天。
② 长期保存:已加入抗凝剂的血液请置于-70℃保存,血液样品应尽量避免反复冻融。
3. 部分试剂中含刺激性化合物,操作时请戴上乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤和眼睛等,并应尽量在通风橱中进行操作。若沾染皮肤、眼睛,要立即用大量清水冲洗,必要时应寻求医疗咨询。
4. 基因组DNA需长期保存时,建议用Elution Buffer洗脱。
5. 标准实验操作适用于人全血材料,其他哺乳动物全血操作基本相同。只是在裂解红细胞时不尽相同,例如马血等材料需要多次处理,才可使红细胞裂解充分 (红细胞膜较厚) ;而一些小型的动物可能需要减少裂解时间和次数。
6. 离心时切不可使用过大的离心力,否则白细胞将会破损,而无法正常悬浮。
7. 10×Buffer RCL是由10×Buffer RCL A和10×Buffer RCL B按照1:4比例混合配制得到,可以现配现用,也可以在首次使用时将10×Buffer RCL A和10×Buffer RCL B全部混在一起,然后保存在4℃,可以保存一年以上。
8. 在使用前一定要确认待提取全血的红细胞是否有核,如果为红细胞有核的全血,若起始量超过10 μl则可能造成Spin Column堵塞。
 
 

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